جداسازی و ایمنوفنوتایپینگ سلول‌های اپی‌تلیالی پرده آمنیون
Authors
Abstract:
Abstract Background: Human amniotic epithelial cells (hAECs) have been introduced as a valuable source of stem cells with therapeutic applications. Despite the extensive study and emerging evidence, cell surface marker signature of hAECs remained controversial. The aim of the present study was to establish an efficient and optimized isolation procedure of hAECs and their characterization in terms of proliferation and stem cell markers. Materials and methods: Four human placentas were collected from healthy women undergoing elective caesarian delivery at term labor under sterile condition. Amniotic membranes were carefully isolated and subjected to trypsin digestion. Single cell suspensions were obtained and the epithelial origin was confirmed by assessment of cytokeratin expression. Expression of CD9, CD10, CD29, CD34, CD38, CD44, CD45, CD73, CD105, CD133, MHC-I, HLA-DR, HLA-G, SSEA-4, STRO-1 and OCT-4 was then evaluated by flow cytometry. Results: The overall yield of hAEC ranged from 80-130×106 cells per placenta with more than 98% viability. Microscopic examination revealed that hAECs are large and refractive cells with great capacity to adhere to plastic surfaces. The cells substantially expressed cytokeratin implying their epithelial origin. Flow cytometry data revealed that hAECs are a heterogenic population consisting of immune phenotypically mixed cells. Nearly all purified cells expressed mesenchymal markers, CD9, CD10, CD29, and CD73. A large proportion of cells also expressed HLA-I, HLA-G, STRO-1, OCT-4 and SSEA-4. Isolated cells, however, failed to express CD34, CD38, CD44, CD45, CD105, CD133 and HLA-DR. Conclusion: The procedure presented here is a simple and cost-effective protocol for isolation of a large numbers of viable hAECs. Surface markers and such features as proliferation capacity of hAECs are among the characteristics that are strongly dependent upon isolation and cell culture conditions. Thus such variables should be taken in to consideration when stem cell properties of hAECs are to be interpreted. Keywords: Placenta, Stem cell, Amniotic membrane, Epithelial cells, Immunophenotype.
similar resources
جداسازی و ایمنوفنوتایپینگ سلول های اپی تلیالی پرده آمنیون
چکیده سابقه و هدف: سلول های اپیتلیال پرده آمنیون (haecs) جمعیت هتروژنی با توانایی تمایز به سه رده سلولی لایه ژرمینال هستند. هدف این مطالعه بهبود روش-های جداسازی و اینمونوفنوتایپینگ سلو ل های بنیادی تخلیص شده با استفاده از پنلی از آنتی بادی های ضد مارکرهای بنیادی بود. روش بررسی: چهار واحد جفتی از مادرانی که تحت جراحی سزارین انتخابی بوده و هنوز نه ماه بارداری کامل نشده بود تهیه گردید و در شرایط ا...
full textپیوند پرده آمنیون برای بازسازی سطح چشم
چکیده دهه گذشته، شاهد ظهور مجدد پیوند پرده آمنیون در چشم‌پزشکی بوده است. پرده آمنیون به دلیل توانش در کاستن از اسکار و آماس، تحریک ترمیم زخم و ترمیم اپی‌تلیوم و نیز به دلیل خواص ضد باکتریایی، دارای اهمیت است. به تازگی از پرده آمنیون به عنوان پایه‌ای برای کشت یاخته‌های بنیادی لیمبوس و پیوند آن به افراد نیازمند استفاده شده است. پیوند پرده آمنیون هم‌چنین به طور وسیعی در ضایعات قرنیه مانند ...
full textبررسی اثرات کرایوپرزرویشن بر سلول های اپی تلیال قبل و بعد از جداسازی از پرده آمنیون انسانی
Background and purpose: One of the recent techniques for increasing the output of cryopreservation is using different scaffolds in long-term preservation of stem cells for cell therapy. Undesirable differentiation and decrease in the number of viable cells are two major problems in this process. In order to overcome these problems, in this study the human amniotic epithelial cells were cryopres...
full textپیوند پرده آمنیون در سوختگی‌های حاد شیمیایی چشم
هدف: ارزیابی نقش درمانی پیوند پرده آمنیون در سوختگی‌های حاد شیمیایی چشم. روش پژوهش: این مطالعه در بیماران با سوختگی شیمیایی درجه 2 تا 4 (تقسیم‌بندی Roper-Hall) انجام شد. بیمارانی که کم‌تر از 2 هفته از آسیب شیمیایی آن‌ها گذشته بود؛ تحت پیوند پرده آمنیون همراه با درمان طبی قرار گرفتند. بیماران از نظر میزان درد، حدت بینایی، بهبود نقص اپی‌تلیومی، ایجاد سیمبلفارون و پیدایش کدورت و نورگ‌زایی قرنی...
full textنتایج ترمیم دیستیکیازیس مادرزادی به وسیله پیوند با پرده آمنیون
چکیده هدف: ارزیابی نقش درمانی پرده آمنیون در درمان دیستیکیازیس مادرزادی. روش پ‍ژوهش: این مجموعه موارد مداخله‌ای بر روی 16 پلک مبتلا به دیستیکیازیس مادرزادی از 5 بیمار انجام شد. در همه موارد، لاملای خلفی پلک به ارتفاع 3 میلی‌متر همراه با مژه‌های اضافی برداشته شد و به جای آن یک قطعه پیوند پرده آمنیون در محل، بخیه گردید. یافته‌ها: همه بیماران مذکر بودند و سن بیماران بین 2 تا 42 سال بود. ...
full textMy Resources
Journal title
volume 37 issue 1
pages 1- 7
publication date 2013-04
By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.
No Keywords
Hosted on Doprax cloud platform doprax.com
copyright © 2015-2023